Prueba de TriiodothyronineT3 ELISA, alta exactitud, método del bocadillo de Elisa, para la medida cuantitativa

Nombre de producto: Prueba de TriiodothyronineT3 ELISA

Uso previsto:

Este T3 total EIA se piensa para la determinación cuantitativa de la concentración de (T3) del triiodothyronine en suero humano. Esta prueba es útil en la diagnosis y el tratamiento de las enfermedades de tiroides tales como hipertiroidismo.

Resumen:

La medida de la concentración del triiodthyronine del suero se mira generalmente como herramienta valiosa en la diagnosis de la disfunción de la tiroides. Esta importancia ha proporcionado el ímpetu para la mejora significativa en la metodología del análisis que ha ocurrido en las dos décadas pasadas. El advenimiento del antisuero monoespecífico y del descubrimiento de los agentes de bloqueo a las proteínas de suero obligatorias T3 ha permitido el desarrollo de radioinmunoanálisis procesal simples

Principio de prueba:

El equipo total de Triiodthyronine (T3) ELISA es un análisis enzima-ligado del inmunosorbente de la fase sólida (ELISA) basado en el principio de atascamiento competitivo. Los pozos del microtítulo están cubiertos con un anticuerpo policlonal del cabra-anti-ratón. Los estándares, los controles y el suero paciente incuban así como el reactivo del análisis que contiene los anticuerpos monoclonales anti-T3. En la incubación siguiente con la conjugación el T3 endógeno de una muestra paciente compite con la conjugación de la peroxidasa de T3-horseradish para un número limitado de puntos de enlace insolubilizados. Después de la incubación la conjugación desatada se lava apagado. La cantidad de conjugación encuadernada de la peroxidasa es inverso proporcional a la concentración de T3 en la muestra. Después de la adición de la solución del substrato, la intensidad del color desarrollada es inverso proporcional a la concentración de T3 en la muestra paciente.

Componentes del equipo

1. Microtiterwells, 12 x 8 (rómpase aparte) tiras, 96 pozos; Wells cubrió con el antígeno de Treponema pálido. (1 tenedor incluyendo de la tira y 1 hoja de la cubierta)
2. *** De Pos. Control, 1 frasco, 1,0 ml, de listo para utilizar; coloreado casquillo amarillo, rojo.
3. Negativo. Controle el ***, 1 frasco, 2,0 ml, de listo para utilizar; coloreado casquillo amarillo, amarillo.
4. *** Del control del atajo, 1 frasco, 1,0 ml, de listo para utilizar; coloreado casquillo amarillo, negro.
5. Conjugación de la enzima **, 1 frasco, 13 ml, de listo para utilizar,
6. Solución del substrato, 1 frasco, 14 ml, de listo para utilizar, Tetramethylbenzidine (TMB).
7. Pare la solución, 1 frasco, 14 ml, de listo para utilizar, contiene 0,2 mol/l H2SO4, evita el contacto con la solución de la parada. Puede causar irritaciones y quemaduras de piel.
8. Solución del lavado *, 1 frasco, 30 ml (20X concentrado para 600 ml), ± 0,2 del pH 7,2 ve la preparación del „de reactivo “.

* contiene el 0.03% ProClin 300

** contiene el 0.03% ProClin sulfato de la gentamicina de 300 del + 0.01%

el *** contiene el 0.03% ProClin 300 el + 0.015% 5 bromo-5-nitro-1,3-dioxane (BND) el + 0.010% 2 methyl-2H-isothiazol-3-one (el MIT)

PROCEDIMIENTO DE ANÁLISIS

1. Asegure el número deseado de pozos del microtítulo en el tenedor del marco.

2. Dispense el µL 10 de cada estándar, control y muestras con nuevas extremidades disponibles en pozos apropiados.

3. Incube por 5 minutos en la temperatura ambiente (18 °C – °C) 25.

4. Dispense la conjugación de la enzima de 100 µL en cada uno bien.

Mézclese a fondo por 10 segundos. Es importante tener una mezcla completa en este paso.

5. Incube por 80 minutos en la temperatura ambiente (18 °C – °C) 25.

6. Sacuda enérgicamente hacia fuera el contenido de los pozos.

Aclare los pozos 5 veces con la solución diluida del lavado (µL 400 por pozo). Pegue los pozos agudamente en el papel absorbente para quitar gotitas residuales.

CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO

1. sensibilidad

La sensibilidad de esta prueba total del T3 EIA se define como la concentración más baja de T3 que puede ser distinguida a partir de 0 ng/mL según lo calculado de los límites de confianza del 95% de las 0 absorciones del estándar de ng/mL. Este método detectará confiablemente las concentraciones T3 de hasta sólo 0,2 ng/ml.

2. precisión

a. Precisión del Intra-análisis

la precisión del Dentro-funcionamiento fue determinada por determinaciones replegadas de tres diversos sueros del control en 1 análisis.

b. Precisión del Inter-análisis

la precisión del Entre-funcionamiento fue determinada por medidas replegadas de tres diversas muestras del suero sobre una serie de análisis individualmente calibrados.

3. estudios de la recuperación y de las linearidades

a. Recuperación

Las diversas muestras pacientes del suero de los niveles sabidos T3 fueron combinadas y probadas dos veces. La recuperación mala era 106%.

Recuperación mala #2 el = 111%

1. Linearidades

Dos muestras fueron diluidas en serie con el estándar cero T3 para determinar linearidades. La recuperación mala era el 99%.

Media = 101%