Protocolo de ensayo ELISA

Etiquetar las tiras individuales que se utilizarán y los reactivos aliquotas como se muestra en el siguiente ejemplo:

• Añadir 50 IU de cada uno de los estandares de kanamicina en duplicado en pozos diferentes (Añadir estandares a la placa sólo en el orden de baja concentración a alta concentración).
• Añadir 50 litros de cada muestra en duplicado en pozos de muestreo diferentes.
• Añadir 50 I.L. de HRP-Conjugated Ab#2 a cada pozo y 50 I.L. de Anticorpos de Kanamicina #1 a cada pozo. Mezclar bien moviendo suavemente la placa manualmente durante 30 segundos.
• Incubar el plato durante 30 minutos a temperatura ambiente (20°C / 68°F). (Se recomienda cubrir la placa de microtiter durante la incubación.)).
• Lávese el plato 4 veces con 250 I.L. de 1 X solución de lavado.No deje que la placa se seque al aire entre las etapas de trabajo).
• Añadir 100L de sustrato de TMB. Tiempo de la reacción inmediatamente después de añadir el sustrato. Mezclar la solución sacudiendo suavemente la placa manualmente durante 30 segundos mientras se incuba.No vuelva a colocar ningún sustrato en el recipiente original para evitar cualquier posible contaminación.Se recomienda cubrir la placa de microtiter durante la incubación.)).
• Después de incubación durante 15 minutos a temperatura ambiente (20 ¢ 25¿ Qué pasa?C / 68 ¢ 77¿ Qué pasa?F: el precio), añadir 100 L de Stop Buffer para detener la reacción enzimática.
• Leer la placa tan pronto como sea posible después de añadir el tampón de parada en un lector de placa con longitud de onda de 450 nm (Antes de leer,utilizar una toalla sin peludas en la parte inferior de la placa para garantizar que la humedad o las huellas dactilares no interfieran con las lecturas).