DNasa I, libre de RNasa, HC
No/Especificación: E1018-A/1000 U
Concentración: 50 U/μL
Descripción del producto
La DNasa I (sin RNasa) es una endonucleasa que puede dividir tanto el ADN de cadena única como el de doble cadena.
Enlaces fosfodiéster, que producen desoxirribonucleótidos únicos y oligodeoxirribonucleótidos con grupos 5'-fosfato y grupos 3'-OH.
La actividad de esta enzima es estrictamente dependiente de Ca2+ y es activada por iones Mg2+ o Mn2+.DNase I corta cada cadena de dsDNA de una manera estadísticamente aleatoria e independienteCuando Mn2+ está presente, la enzima casi corta ambas hebras de ADN en el mismo sitio, lo que resulta en fragmentos de ADN con extremos contundentes o sobresalientes de uno o unos pocos nucleótidos.
Condición de almacenamiento y vida útil
Conservar a -20°C.
Fuente
Cepa recombinante de E. coli que contiene el gen clonado que codifica la DNasa I bovina.
Definición de la unidad
Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para degradar completamente 1 μg de ADN plasmídico en un minuto a 37 °C.
La actividad enzimática se determina en la siguiente mezcla: 10 mM de Tris-HCl (pH 7,5 a 25°C), 2,5 mM de MgCl2, 0,1 mM de CaCl2 y 1 μg de ADN pUC19.
Una unidad de DNasa I es equivalente a 0.3 unidades Kunitz.
Características
- Enzima recombinante
- Purificado de un huésped no animal, con bajos niveles de RNasa endógena
Aplicación
- Para la preparación de ARN libre de ADN.
- Para eliminar el ADN modelo después de la transcripción in vitro.
- Para preparar ARN libre de ADN antes de RT-PCR y RT-qPCR.
- Junto con la ADN polimerasa I para el etiquetado del ADN a través de la traducción de nick.
- Para el estudio de las interacciones ADN-proteína utilizando la huella de DNasa I (libre de RNasa).
Para generar una biblioteca de fragmentos de inserción de ADN cortados al azar, se utiliza un búfer de reacción que contiene Mn2+.